Pengaruh Perbandingan Sterilan Hidrogen Peroksida (H2O2) dan Nanobubbles ozon (NBSO3) terhadap Eksplan Anggrek Cattleya sp.

Abstract

Sterilization is the initial stage that is the key to the success of in vitro culture. In addition to tools and materials, explants also need to be sterilized. One sterilant that can be used is hydrogen peroxide (H₂O₂). H₂O₂ is a chemical compound that can activate the antioxidant defense system to prevent damage ti plant cells. In addition to H₂O₂, ozone Nanobubbles (NBsO₃) can also be used as a sterilant because they can stimulate plant growth with a very small form of oxygen and have antioxidants, accelerate photosynthesis and increase nutrient absorption in tissue culture techniques. The purpose of this study was to determine the effect and comparison of the effectiveness of H₂O₂ and NBsO₃ in increasing the growth of Cattleya sp. Orchids. This research method was experimental with a completely randomized design (CRD) with 5 treatments and each treatment had 5 replications. The first treatment: was aquadest for 5, 10 and 15 minutes. The secound treatment: 96% alcohol for 5, 10 and 15 minutes. The third treatment: 1% H₂O₂ for 5, 10 and 15 minutes. The fourth treatment: NBsO₃ for 5, 10 and 15 minutes. The fifth treatment: a combination of NBsO₃ + 1% H2O2 for 5, 10 and 15 minutes. The parameters observed were the percentage of living explants, the time of cintamnation, and the type of contamination. Qualitative data analysis ws descriptively presented in the form of tables and graphs. The data analysis used was the multivariate analysis of variance (MANOVA) test. The MANOVA test showed that treatment had a significant effect on live explants (p= 0.011), but immersion time (p= 0.830) and the interaction between the two (p= 0.947) werw not significant. The tukey HSD follow up test showed that the NBsO₃ and 1% H₂O₂ treatment with a 10 minute immersion was the best combination of treatment and immersion time. The results of the study showed that the treatment of NBsO₃and 1% H₂O₂ with immersion for 10 minutes was the best combination of treatment and immersion time because it showed that the explants were still sterile with a high survival percentage of 90-95%.

Keywords: Sterilant, H₂O₂, NBsO₃, Culture, Orchids

ABSTRAK

Sterilisasi merupakan tahap awal yang menjadi kunci keberhasilan kultur in vitro. Selain alat dan bahan, eksplan juga perlu di sterilisasi salah satu bahan sterilan yang dapat digunakan adalah hidrogen peroksida (H₂O₂). Dalam sterilisasi H₂O₂ melepaskan oksigen saat terurai, menciptakan lingkungan oksidatif yang merusak struktur sel, membantu menjaga kondisi aseptik didalam media kultur, meminimalkan resiko kontaminasi dan dukung pertumbuhan jaringan tanaman yang bersih.Selain H₂O_2, Nanobubbles ozon (NBsO₃) juga dapat digunakan sebagai bahan sterilisasi karena dapat membunuh mikroorganisme dan menguraikan kontaminan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh dan perbandingan efektifitas H₂O₂ dan NBsO₃ dalam sterilisasi anggrek Cattleya sp. Metode penelitian ini adalah eksperimental dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan dan masing-masing 5 ulangan. Perlakuan pertama: kontrol akuades selama 5, 10, dan 15 menit. Perlakuan kedua: alkohol 96% selama 5, 10, dan 15 menit. Perlakuan ketiga: H₂O₂ 1% selama 5, 10, dan 15 menit. Perlakuan keempat: NBsO₃ selama 5, 10 dan 15 menit. Perlakuan kelima: kombinasi NBsO₃+H₂O₂ 1% selama 5, 10 dan 15 menit. Parameter yang diamati yaitu persentase eksplan hidup, waktu muncul kontaminasi dan jenis kontaminasi. Analisis data kualitatif secara deskriptif disajikan dalam bentuk tabel dan grafik. Analisis data yang digunakan adalah uji Multivariate Analysis of Variance (MANOVA). Uji MANOVA menunjukkan perlakuan berpengaruh signifikan terhadap eksplan hidup (p = 0,011), namun waktu perendaman (p = 0,830) dan interaksi keduanya (p = 0,947) tidak signifikan. Uji lanjut Tukey HSD menunjukkan tidak terdapat perbedaan signifikan antar kelompok perlakuan (p > 0,05). Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan NBsO₃ dan H₂O₂ 1% dengan perendaman selama 10 menit merupakan kombinasi terbaik dari perlakuan dan lama perendaman karena menunjukkan kondisi eksplan yang masih steril dengan persentase hidup yang tinggi yaitu 90-95%.

    Kata kunci: sterilan, H₂O₂, NBsO₃, Kultur, Anggrek